【發(fā) 明 者】Chia; Erin R.; (Berkeley, CA) ; Hiddessen; Amy L.; (Dublin, CA) ; Hindson; BenjaminJ.; (Livermore, CA) ;Lowe; Adam; (Mountain House, CA); Han; Chunxiao; (Dublin, CA)
【申 請(qǐng) 人】Bio-Rad Laboratories, Inc.
【申 請(qǐng) 號(hào)】US14216006
【申 請(qǐng) 日】2014-03-17
【公 開(kāi) 號(hào)】US20140272995
【公 開(kāi) 日】2014-09-18
【簡(jiǎn) 介】
【發(fā)明背景】
乳液是兩種或多種正常情況下不相溶的液體的混合物。通常情況下,其中一種液體作為分散相分散在另一種作為連續(xù)相的液體中。乳液為高通量檢測(cè)的技術(shù)革新提供了強(qiáng)有力的保障,因?yàn)槿榛夹g(shù)可以創(chuàng)造出成千上百萬(wàn),甚至上億的離散水滴。這些離散水滴分散在連續(xù)相中,彼此之間相互隔離,可作為生物化學(xué)反應(yīng)的獨(dú)立反應(yīng)室。即使是很少量的水性樣品也可以分散成數(shù)量巨大的離散液滴,例如200ml的水性樣品可以分散成大約400萬(wàn)的離散液滴,每個(gè)離散液滴的體積大概為50pl。通過(guò)這種方式,可以控制和處理單個(gè)生物組分(例如:細(xì)胞、核酸和蛋白質(zhì)等),并以大規(guī)模高通量的方式其進(jìn)行離散研究。
用于高通量檢測(cè)的乳液連續(xù)相中一般包含一種全氟化油類和一種全氟表面活性劑。使用這種親氟的連續(xù)相包裹液滴能為某些生物化學(xué)反應(yīng)提供適當(dāng)?shù)闹車h(huán)境,例如,在液滴內(nèi)部進(jìn)行的PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
然而,含有全氟化油類的乳液有一些缺陷。如,通常情況下,水性液滴會(huì)漂浮于全氟化油中,這給液滴控制帶來(lái)一些問(wèn)題。乳液上面的漂浮液滴暴露于空氣中時(shí)更容易被破壞,特別是加熱情況下。此外,為了使液滴更靠近熱源,需要移除乳液中液滴下方多余的油類。而且,當(dāng)進(jìn)行加熱處理時(shí)這些液體很難穩(wěn)定(例如:促進(jìn)擴(kuò)增反應(yīng)的熱循環(huán))。