綜合文獻(xiàn)報道的17 類脂肽的氨基酸組成的實測結(jié)果,其中12 類脂肽分子中含有一個谷氨酸或谷氨酰胺殘基。基于此事實提出了通過測定氨基酸來測定微生物發(fā)酵液中脂肽類生物表面活性劑的方法。將枯草桿菌發(fā)酵液離心除菌體,測得表面張力為26 mN/ m ,用氯仿/ 甲醇萃取,除去肽和蛋白,鹽酸水洗,得到分析用生物表面活性劑樣品。用TLC 方法定性為一種脂肽,用紅外光譜法確認(rèn)屬于環(huán)脂肽類。用氨基酸定量分析法測得該脂肽含有谷氨酸或谷氨酰胺、天冬氨酸或天冬酰胺、纈氨酸及亮氨酸殘基,由谷氨酸濃度得到發(fā)酵液中脂肽濃度為2.82 ×10 - 4 mol/ L 。實驗確定了有機(jī)溶劑萃取和酸洗次數(shù)及酸水解時間等操作參數(shù)。該方法簡便易行,取樣量少(10 mL發(fā)酵液) ,測定結(jié)果準(zhǔn)確,平均回收率94.1 % ,標(biāo)準(zhǔn)偏差1.21 ,相對偏差1.28 %。圖3 表4 參29 。
