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氟碳表面活性劑的應(yīng)用—蛋白質(zhì)分離

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2011-11-18  瀏覽次數(shù):555
核心提示:氟碳表面活性劑的應(yīng)用—蛋白質(zhì)分離

蛋白質(zhì)分離

    陽離子氟碳表面活性劑和陰離子氟碳表面活性劑的混合物被用作蛋白質(zhì)自由流動(dòng)毛細(xì)電泳的添加劑。由于毛細(xì)管壁的有效減活作用而有可能使用粗熔融硅毛細(xì)管。電滲透流動(dòng)的量和方向受到氟碳表面活性劑混合物的強(qiáng)烈影響。這一現(xiàn)象被解釋為表面活性劑層的膠束化和定向膠柬的形成。由于采用了帶相反電荷的氟碳表面活性.劑的混合物,所以有可能在同一過程既分離帶正電荷的蛋白質(zhì)又分離帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)。由于氟碳表面活性劑和蛋白質(zhì)的電荷的互相作用,因而可能調(diào)整分離的選擇性而不必改變緩沖劑的強(qiáng)度或pH值。這一特點(diǎn)可從模型物質(zhì)肌紅朊和Rnase的可轉(zhuǎn)向的洗提次序得到證明。氟碳表面活性劑作為添加劑的另一特點(diǎn)是在低濃度、(<100μgmL)的有效性,甚至在使用低離子強(qiáng)度的緩沖劑時(shí)也是如此。所以在高場強(qiáng)度就能完成快速分離而不會(huì)出現(xiàn)過量的焦耳熱。例如,帶正電荷和負(fù)電荷的蛋白質(zhì)混合物,在10mmolL磷酸鹽緩沖劑調(diào)節(jié)至pH=7的條件下,在小于2min的時(shí)間內(nèi)即可迅速分離。

    通過氟碳表面活性劑對硅玻璃的處理,發(fā)展了一種測定吸附蛋白質(zhì)的表面潤濕性的新方法[68],這種方法無需等待干燥就可測定。在較高的蛋白質(zhì)濃度,氟碳表面活性劑處理過的玻璃上的蛋白質(zhì)表面是完全親水的。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度較低時(shí),則蛋白質(zhì)層的親水性取決于氟碳表面活性劑的種類,同時(shí)也取決于蛋白質(zhì)的吸附過程。

 

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